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psp77926 發表於 2013-1-5 05:41 PM

[生物技術]問題

1.簡略敘述常用得生物技術方法有哪些,至少五種
2.生物技術如何應用於環境廢棄物減量與汙染防治?

3.植物組織培養對現代農業有哪些貢獻?有哪些必須的基本步驟與過程

4.生物技術在農 漁 牧業有哪些層面的應用簡略說明?

5.欲選殖一株真菌之抗菌蛋白基因,你的選殖策略將如何設計?

6.利用β-半乳糖苷酶的活性進行藍白篩選是基因工程上常用的技術,敘述這個篩選方法的原理和步驟
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sh55016a 發表於 2013-1-17 03:28 PM

這是哪裡的題目?

感覺是學習單之類的
高中還是大學的??

psp77926 發表於 2013-1-18 12:38 PM

sh55016a 發表於 2013-1-17 03:28 PM static/image/common/back.gif
這是哪裡的題目?

感覺是學習單之類的




大學的問題







dennygod 發表於 2013-1-18 11:22 PM

路過
回答比較好答的第一題= =其他題目比較沒信心

1.簡略敘述常用得生物技術方法有哪些,至少五種

PCR
凝膠電泳
基因療法
印漬法
製造醫療用品像是胰島素或疫苗等
利用SNPs進行疾病偵測

應該沒列錯吧XD
我覺得像抗生素,羊膜穿刺術,絨毛取樣術也算吧
普生應該都有介紹到

a057687 發表於 2013-2-1 10:12 AM

本帖最後由 a057687 於 2013-2-1 11:14 AM 編輯

好吧 現在回答應該是趕不及樓主大學課程的需求了, 但是也可以簡單解惑一下關於藍白篩的步驟
6.利用β-半乳糖苷酶的活性進行藍白篩選是基因工程上常用的技術,敘述這個篩選方法的原理和步驟

藍白篩, 是利用基因選殖的技術,利用beta-galactosidase會分解半乳糖的酵素活性進行選殖成功與否的鑑定

首先整個Lac operon的功能解說就跳過, 那個會占掉太多的篇幅
基本上, 看到圖的左下那個圈圈,他代表細菌的載體(含有抗生素及lacZ基因)
深色部分即為LacZ基因所在位子,旁邊有拉出一個小方格
那個叫做MCS(multipule cloning site),是一段特殊設計的基因序列,也就是限制酵素切位
在基因工程中, 科學家們通常會把欲轉殖基因接到MSC裡面
接到MSC中的基因序列將會破壞LacZ基因的完整性, 造成beta-galatosidase的功能喪失
接著轉回圖片右下角
可以看到X-gal以及beta-galactosidase
X-gal在一個功能正常的beta-galactosidase作用下
會分解成藍色的物質以及一個葡萄糖(glucose)分子
也就是說
沒有外源基因插入Lac operon才能產生功能正常的beta-galactosidase
所以會產生藍色的菌落是轉殖失敗的, 不是我們想要的
以上為原理部分

步驟部分
1.設計引子(primer)並利用PCR的技術將目標基因放大
2.將所取得的基因片段利用適當的限制酵素(RE,rescriction enzyme)反應後,將之結合到帶有lac operon的質體上
3.將完成結合之質體,利用細菌轉型的方法將之送入勝任細胞
(注意, 這種勝任細胞需要為"LacZ-", 也就是本身沒有Lac Z 基因的細菌)
4.將細菌塗在帶有IPTG及X-gal之培養機上進行培養約16-24小時,待其行程菌落
5.挑出白色菌落, 進行下一步的確認

備註:1.IPTG,為乳糖的結構類似物, 目的為啟動Lac operon
            2.X-gal為半乳糖的analogue, 可做為beta-galactosidase之受質
            3.選殖用的質體上為什麼要有抗生素及Lac opero, 這與pastive selection及negative selection有關了

更詳細的內容如果有了解的需求可以去找"lac operon"
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謝家豪 發表於 2013-2-4 11:48 PM

大家都好強
我才高一
希望以後也能變的跟樓上的一樣{:35:}
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